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Der Probe auf der Spur – moderne Hochleistungsanalytik erklärt
anhand von Beispielen
DI(FH) Michael Zwitkovits, MSc GMDP
Illegale und gefälschte Arzneimittel – Untersuchung im Arzneimittelkontrolllabor
Wien, 26.2.2014
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Omnadren
Gaschromatographie-Massenspektrometrie (GCMS)
Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC)
Adipex retard
Ultra High Performance Liquid Chromatography-Time of Flight Massenspektrometrie (UPLC-Q-TOF MS)
Infrarot Spektroskopie (IR)
Einleitung
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Omnadren
• Mischung aus 4 verschiedenen Testosteron-Estern
• Als Arzneimittel in anderen EU Ländern zugelassen, z.B. Polen
• Häufig benutztes Doping-Präparat
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Omnadren - Identität
Gaschromatographie-Massenspektrometrie (GC-MS)
Gaschromatographie: Auftrennung von komplexen Probenmischungen
Massenspektrometrie: Identifizierung der Einzelkomponenten
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Omnadren - Identität
Chromatogramm
Spektrum
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Omnadren - Identität
Vergleich mit Bibliothek
Massenspektrum Probe:
Massenspektrum Referenz:
Testosteron Propionat
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Omnadren - Identität
Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC)
• Ultra???? - rasche Auftrennung von komplexen Proben
bei sehr hohem Druck (bis ca. 1000 bar)
• Ergänzende Identitätsuntersuchung
• Vor allem geeignet für Gehaltsbestimmung
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Omnadren - Identität
In einem vorangegangen Fall ergab die Analyse mit GCMS Unstimmigkeiten – als zweite Methode wurde eine Identifizierung mit UHPLC durchgeführt:
UHPLC-Chromatogramm von einer typischen Omnadren Probe:
laut Label Claim 4 verschiedene Testosteron-Ester
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Omnadren - Identität
Erwartetes Chromatogramm
laut Label Claim
Ein Unterschied zwischen den Packmitteln konnte nicht festgestellt werden!
In 47 von 54 Gebinden eine
andere Zusammensetzung
In 7 von 54 Gebinden keine
Testosteron Ester
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Adipex Retard
• Wirkstoff: Phentermin (Grundstruktur ähnlich Amphetamin)
• Hergestellt in Österreich. Als Arzneimittel in anderen EU-Ländern wie der Tschechischen Republik zugelassen.
• Appetitzügler
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Adipex Retard
Fälschungsverdacht Sommer 2013
• Übermittlung von mehreren Proben mit Fälschungsverdacht
• Packmittel unterscheidet sich vom Originalpräparat
Originalpräparat Probe
• Bei der Probenaufarbeitung werden Unterschiede in der Härte der Gelatinekapseln festgestellt.
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Adipex Retard - Identität
UHPLC-Q-TOF MS
Ultra High Performance Liquid Chromatography
-Time of Flight Massenspektrometer
• Rasche Trennung von komplexen Mischungen
• Exakte Massen der Einzelkomponenten
• Bei Bedarf Fingerprints der Einzelkomponenten
Alle Proben enthielten Phentermin
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Adipex Retard - Gehalt
Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC)
Vergleich Signalintensität Probe mit Signalintensität zertifiziertem
von Referenzstandard
Analysenergebnis Adipex
Bei der Etablierung der Gehaltsbestimmung
Ergaben die ersten Messungen deutlich reduzierte
Gehalte.
Vom Originator wurden die Prüfvorschriften über-
mittelt. Bei Stresstests wurde festgestellt, dass die
Probelösung nur in einem sehr engen pH-Wertbereich
stabil ist.
Alle Proben entsprachen den Spezifikationen in
der Prüfvorschrift
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Adipex Retard - Identität
Infrarot-Spektroskopie (IR)
Probe wird Infrarotstrahlung ausgesetzt -> ergibt charakteristisches Spektrum
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Adipex Retard - Identität
Infrarot-Spektroskopie (IR)
Vergleich der Spektren von Probe (Kern + Hülle) mit Originalpräparat
Original
Probe
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Adipex Retard - Conclusio
Alle Proben entsprechen betreffend Gehalt und Identität den Spezifikationen. Ein Unterschied zwischen den Proben und den Originalmustern konnte nicht festgestellt werden.
…und das unterschiedliche Packmittel?
Laut Auskunft des Originators wurde das Packmittel vor einigen
Jahren geändert. Die auf den Proben angeführten Chargen
wurden vom Originator in Verkehr gebracht.
Es besteht kein Verdacht, dass es sich bei den
vorliegenden Proben um Fälschungen handelt.