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Papain-Lösung: Die pflanzliche Alternative zu Trypsin
Papain führt zur proteolytischen spaltung (hydro-lyse) von Proteinen und Peptiden, vorzugsweise an basischen Aminosäuren. das Papain für die herstellung dieser gebrauchsfertigen Papainlö-sung (61,25 mg/l) in Pbs ohne ca2+/mg2+ wird aus Papaya (Carica papaya) gewonnen.
die lösung zeigt im Vergleich zur trypsinlösung bei +2 – +8 °c nur eine kurze haltbarkeit. eine noch nicht angebrochene originalverpackung sollte daher nach dem Auftauen portioniert und wieder eingefroren werden. die haltbarkeit einer aufgetauten und bei +2 – +8 °c gelagerten lösung ist auf 36 h begrenzt.
Produkt Kat. Nr. Einheit
Papain-Lösung (61,25 mg/l)ohne ca2+/mg2+
lagertemperatur: –20 °c
l 2223 100 ml
Anwendungshinweis Papain-Lösung:
• Zum Passagieren der Zellen Zellkultur-Überstand dekantieren• Zellen einmal mit 5 ml Pbs (ohne ca2+/mg2+; kat. nr. l 1825/0) waschen• Überstand dekantieren• kulturgefäß (je nach Größe) mit 1,0 – 2,5 ml Papainlösung versetzen• einwirkzeit des Papains 5 – 7 min (bei +15 – +25 °c) unter entsprechender bewegung des kulturgefäßes und mikros-
kopischer kontolle der Zellablösung• Zellen in ein steriles Zentrifugenröhrchen überführen, bei 300 g für 10 min zentrifugieren• Überstand dekantieren und Pellet mit 15 ml kulturmedium aufnehmen• nach erneuter Zentrifugation Pellet in kulturmedium aufnehmen und in ein kulturgefäß aussäen
BIOCHROM KAT 10 Druckfassung.indd 107 01.12.2009 11:39:45 Uhr