vdrl cardiolipin-antigen

7/26/2019 VDRL Cardiolipin-Antigen

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ORAA G11 C0840 (140) S 1

VDRL Cardiolipin Antigen

Intended UseVDRL (Venereal Disease Research Laboratory) Cardiolipin Antigen is a precipitation reagent thataids in the detection and quantification of lipoidal antibodies in serum.The test was developed for testing individual samples, not for pooled samples.The product is for in vitrodiagnostic use only.

Summary and ExplanationThe detection and quantification of lipoidal antibodies is of diagnostic importance in connectionwith the diagnosis of syphilis, primarily for follow-up and assessment of the effectiveness of thera-py1-5. The findings obtained must be considered in conjunction with the results of treponema-specific tests (EnzygnostSyphilis, IgM-FTA-ABS, FTA-ABS, indirect hemagglutination).Refer to the relevant li terature for the evaluation of findings.

Principle of the MethodSerum or liquor is mixed with cardiolipin antigen on a slide. The presence of anti-lipoidal antibo-dies causes agglutination (formation of precipitate) with cardiolipin antigen.If no anti-lipoidal antibodies are present, the suspension remains cloudy throughout.

ReagentsMaterials provided in the VDRL kit:VDRL Cardiol ip in Antigen 1 pcs.Dilution liquid 1 pcs.Instructions for use 1 pcs.

CompositionVDRL Cardiolipin Antigen, bovine, in alcoholic solution:Cardiolipin 0.3 g/L

Lecithin 2.1 g/LCholesterol 9.0 g/L

Dilution fluidFormaldehyde 0.58 g/LNa2HPO4x 12 H2O 93 mg/LKH

2PO

4170 mg/L

NaCl 10.0 g/L

Warnings and Precautions1. For in vitrodiagnostic use only.2. VDRL Cardiolipin is contained in an alcoholic solution and is highly flammable. The container

must be kept tightly closed and removed from sources of ignition.3. It is advisable to wear protective gloves throughout the entire test procedure.4. For the disposal of solid infectious materials, autoclaving for at least 1 hour at +121 C is

recommended. Disinfectants suitable for inactivating human pathogens may also be used. Theconcentrations and times specified by the manufacturer must be observed.

Preparations of Reagents

Preparation of the Antigen SuspensionPut 0.4 mL dilution fluid into a glass vial and then slowly add 0.5 mL of antigen while agitating.Do not allow the pipette to come into contact with the dilution fluid.

Squeeze out the last few drops and then gently agitate the fluid by swaying it from side to side afew seconds more.

Add 4.1 mL dilution fluid, close the vial, and shake vigorously.The suspension must be used within one day.

Preparation of serumInactivate sera for 30 minutes at +56 C 2 C. Samples that have already been inactivated mustbe inactivated again after more than 4 hours for 10 minutes at +56 C 2 C.Liquors are not inactivated.

Storage and StabilityAll components of the test kit may be used up to the date indicated on the label if stored at atemperature between +15 to +25 C.For complete stability and storage data for opened reagents or reagents diluted for use, see thefollowing table.

Reagent State Storage Stability

VDRL Cardiolipin Antigen after opening +15 to +25 C up to expiry datetightly closed

VDRL-Cardiolipin-Antigen diluted ready for use +15 to + 25 C 1 dayDilution liquid after opening +15 to +25 C up to expiry date

tightly closed

Materials required but not providedLues Standard Serum (Code No. ORDN) as a control for the reaction and for quantitative evalua-tion of cardiolipin antibodies.Slides with wells.

SpecimensSuitable specimens for testing are individual serum samples obtained by standard laboratorytechniques.The samples should be stored for no longer than 3 days at +2 to +8 C. If the samples are to bestored for a longer period of time, they must be frozen.Inactivate the sera before testing for 30 minutes at +56 C 2 C.

ProcedureSlide Test with Serum1. Dispense and distribute 50 L inactivated serum onto a slide with wells (14 mm).2. Add 17 L antigen suspension with a piston-type pipette.3. Agitate for 4 minutes on a rotation device (180 50 rpm and 1.9 cm circular movement).The assessment is performed immediately upon finishing the rotation with a microscope at 100fold magnification:no agglutination non-reactingagglutination not clearly recognizable questionable reactionsmall but clear agglutination weak reactionstrong agglutination reacting

Internal Quality ControlLues Standard Serum is used as a control for internal quality control.

Quantitative determination of antibody contentFor the determination of cardiolipin antibodies, the slide test is performed with 50 L each of a geo-

metric dilution series of the inactivated serum. Dilution fluid is recommended for the dilution of serum.The corrected mean titer or the number of International Units per mL is based on comparative titrationof the Lues Standard Serum according to the recommendations of the German Federal Health Autho-rity. The titer is the reciprocal value of the last dilution level to be determined as "reacting".

Limitations of the Procedure1. Incompletely coagulated sera and microbially contaminated test samples should not be used.

Any particulates (e.g. fibrin clots, erythrocytes) contained in the samples should be removedprior to assay.

2. If thawed samples are used, ensure that the material is thoroughly homogenized.3. The reagent is only suitable for testing individual samples, not for pooled samples.4. The instructions given for the preparation of the antigen suspension must be followed very

closely.

Specific Performance CharacteristicsVDRL Cardiolipin Antigen is suitable for the detection of anti-lipoidal IgG and IgM antibodies.The performance of each lot of reagent is tested with clinically known positive and negative controls.

Bibliography1. Bekmpfung von Geschlechtskrankheiten, Richtlinien zur Serodiagnose der Syphilis; K.-E.

Gillbert; Bundesgesundheitsblatt 18, 1-7 (1975)2. Richtlinien 1979 Serodiagnose der Syphilis; K.-E. Gillbert; Bundesgesundheitsblatt 22 (1979),

398-400

3. Neue Entwicklung auf dem Gebiet der Syphilisserologie; A. Luger; Wiener klininische Wo-chenschrift, 92. Jahrgang, 11(1980, 375-379)4. Moderne Serologie der Syphilis; H. J. Hagedorn, P. Naumann; Dtsch. med. Wschr. 104 (1979),

209-214

5. Moderne serologische Syphilis-Diagnostik; H.P. Geisen, H.P, Seelig; Lab. med. 3, 23 (1979)

Enzygnost is a registered trademark of Dade Behring Marburg GmbH in the USA, Germany andother countries.

Dade Behring Marburg GmbHEmil-von-Behring-Str. 76D-35041 Marburgwww.dadebehring.com

USADistributor: Dade Behring Inc.Newark, DE 19714 U.S.A.

Edition December 2003


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VDRL-Cardiolipin-AntigenAnwendungsbereichVDRL (Venereal Disease Research Laboratory)-Cardiolipin-Antigen ist ein Flockungsreagenzund dient zum Nachweis und zur Quantifizierung des Lipoid-Antikrpers in Serum.Der Test wurde entwickelt fr die Untersuchung von Einzelproben, nicht von gepoolten Proben.Das Produkt darf nur fr in-vitro-diagnostische Zwecke angewendet werden.

Diagnostische BedeutungDer Nachweis und die Quantifizierung von lipoidalen Antikrpern ist im Rahmen der Lues-Diagno-stik vor allem fr die Verlaufskontrolle und zur Beurteilung des Therapieerfolges von diagnosti-scher Bedeutung1-5. Dabei mssen die erhobenen Befunde im Zusammenhang mit Ergebnissen

treponemenspezifischer Tests (EnzygnostSyphilis, lgM-FTA-ABS, FTA-ABS, indirekte Hmag-glutination) gesehen werden.Zur Befundbeurteilung wird auf die einschlgige Literatur verwiesen.

Prinzip der MethodeSerum bzw. Liquor wird auf einem Objekttrger mit Cardiolipin-Antigen vermischt. Bei Vorhanden-sein antilipoidaler Antikrper kommt es zur Agglutination (Flockenbildung) mit Cardiolipin-Antigen.Im negativen Fall bleibt die Suspension gleichmig trb.

ReagenzienInhalt der Handelspackung VDRL:VDRL-Cardiolipin-Antigen 1 StckVerdnnungsflssigke it 1 StckPackungsbeilage 1 Stck

Zusammensetzung

VDRL-Cardiolipin-Antigen,vom Rind, enthlt in alkoholischer Lsung:Cardiolipin 0,3 g/lLecithin 2,1 g/lCholesterin 9,0 g/l

VerdnnungsflssigkeitFormaldehyd 0,58 g/l

Na2HPO4x 12 H2O 93 mg/lKH

2PO

4170 mg/l

NaCl 10,0 g/l

Warnungen und Vorsichtsmanahmen1. Nur zur in-vitro-diagnostischen Anwendung.2. Das VDRL-Cardiolipin liegt in alkoholischer Lsung vor und ist leicht entzndlich. Der Behlter

ist dicht verschlossen und von Zndquellen fern zu halten.3. Das Tragen von Untersuchungshandschuhen whrend der gesamten Testdurchfhrung wird

angeraten.4. Fr die Entsorgung infektiser Materialien empfiehlt sich eine Autoklavierung von mindestens

1 Stunde bei +121 C. Es knnen auch Desinfektionsmittel eingesetzt werden, die geeignetsind, human-pathogene Erreger zu inaktivieren. Die vom Hersteller angegebenen Konzentra-tionen und Einwirkzeiten mssen beachtet werden.

Vorbereitung der Reagenzien

Herstellung der Antigensuspension0,4 ml Verdnnungsflssigkeit in eine Glasflasche geben und 0,5 ml Antigen langsam unter Scht-teln zusetzen.Die Pipette darf nicht mit der Verdnnungsflssigkeit in Berhrung kommen.Letzten Tropfen ausblasen und die Flssigkeit noch einige Sekunden schwenken.4,1 ml Verdnnungsflssigkeit zusetzen, Flasche verschlieen, krftig vertikal schtteln.Die Suspension darf nur innerhalb eines Tages verwendet werden.

SerumvorbereitungSeren 30 Min. bei +56 C 2 C inaktivieren. Bereits inaktivierte Proben werden nach mehr als 4Stunden erneut 10 Min. bei +56 C 2 C inaktiviert.

Haltbarkeit und LagerungsbedingungenUngeffnet sind alle Bestandteile des Testkits bei einer Lagerungstemperatur von +15 bis +25 Cbis zu dem auf den Etiketten angegebenen Datum verwendbar.Die Haltbarkeits- und Lagerungsbedingungen der geffneten bzw. gebrauchsverdnnten Rea-genzien sind der nachfolgenden Tabelle zu entnehmen.

Reagenz Zustand Lagerung Stabilitt

VDRL-Cardiolipi n-Antigen nach ffnen, +15 bis +25 C bis Verfall sdatumdicht verschlossen

VDRL-Cardiolipin-Antigen gebrauchsverdnnt +15 bis +25 C 1 TagVerdnnungsflssigkeit nach ffnen, +15 bis +25 C bis Verfall sdatum

dicht verschlossen

Zustzlich bentigte MaterialienLues-Standardserum (Bestell-Nr. ORDN) zur Kontrolle der Reaktion und Quantifizierung des Car-diolipin-Antikrpers.Objekttrger mit Vertiefungen.

UntersuchungsmaterialZur Untersuchung knnen Einzelseren verwendet werden, welche nach Standard-Labortechni-ken entnommen wurden.

Die Proben sollten maximal 3 Tage bei +2 bis +8 C gelagert werden. Zur lngeren Lagerung sinddie Proben einzufrieren.Die Seren werden vor der Bestimmung 30 Min. bei +56 C 2 C inaktiviert.

TestdurchfhrungObjekttrgertest mit Serum1. 50 l inaktiviertes Serum auf einen Objekttrger mit Vertiefungen (14 mm) geben und verteilen.2. 17 l Antigensuspension mittels einer Kolbenhubpipette zugeben.3. 4 Min. lang auf einem Rotationsapparat (180 50 UpM und einer 1,9 cm Kreisbewegung)

bewegen.Die Beurteilung erfolgt sofort nach Beendigung der Rotation mit Mikroskop bei 100-facherVergrerung:

keine Verklumpung nicht reagierendnicht sicher erkennbare Verklumpung fraglich reagierendkleine, aber deutliche Verklumpung schwach reagierendstrkere Verklumpung reagierend

Interne QualittskontrolleZur internen Qualittskontrolle wird das Lues-Standardserum als Kontrolle eingesetzt.

Quantitative Bestimmung des AntikrpergehaltesZur Bestimmung des Cardiolipin-Aritikrpers wird der Objekttrgertest mit je 50 l einer geometri-schen Verdnnungsreihe des inaktivier ten Serums durchgefhrt. Fr die Verdnnung von Serumwird die Verwendung von Verdnnungsflssigkeit, empfohlen.Der korrigierte mittlere Titer bzw. die Anzahl der internationalen Einheiten pro ml ergeben sichentsprechend den Empfehlungen des Bundesgesundheitsamtes durch vergleichende Titrationdes Lues-Standardserum. Als Titer wird der Reziprokwert der letzten Verdnnungsstufe bezeich-net, der als "reagierend" festgestellt wird.

Einschrnkungen der Testdurchfhrung1. Ungengend geronnene Seren und mikrobiell kontaminierte Untersuchungsproben sollten

nicht eingesetzt werden. Eventuell vorhandene partikulre Komponenten (z.B. Fibrin-Gerinn-

sel, Erythrozyten) sollten vor der Testdurchfhrung entfernt werden.2. Bei aufgetauten Proben ist auf eine gute Homogenisierung des Materials zu achten.3. Das Reagenz ist nur fr die Untersuchung von Einzelproben nicht von gepoolten Proben geeignet.4. Die gegebenen Hinweise sind bei der Herstellung der Antigensuspension sehr genau einzu-

halten.

Leistungsmerkmale des TestsDas VDRL-Cardiolipin-Antigen ist zum Nachweis von antilipoidalen IgG- und IgM-Antikrpern ge-geignet.Die Leistungsfhigkeit des Reagenzes wird bei jeder Charge mit klinisch bekannten positiven undnegativen Kontrollen berprft.

LiteraturSiehe englische Packungsbeilage.

Enzygnost ist eine eingetragene Marke der Dade Behring Marburg GmbH in den USA, Deutsch-land und anderen Lndern.


Ausgabe Dezember 2003


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Antigne cardiolipidique VDRLDomaine dutilisationLAntigne cardiolipidique VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) est un ractifdagglutination qui permet l a mise en vidence et la quantification d'anticorps anti-lipodal dans lesrum.Le test a t mis au point pour lanalyse dchantillons individuels, et non dchantillons pools. Ilne peut tre utilis qu des fins de diagnostic in vitro.

Intrt diagnostiqueLa mise en vidence et la quantification des anticorps anti-lipodaux dans la cadre de lexplorationde la syphilis prsentent surtout un intrt particulier pour le contrle du suivi et lvaluation du

succs dun traitement1-5.Cependant, les rsultats doivent toujours tre lus en liaison avec ceuxobtenus dans les tests trponmiques spcifiques (EnzygnostSyphilis, IgM-FTA-ABS, FTA-ABS, hmagglutination indirecte).Pour linterprtation des rsultats, se reporter la littrature correspondante.

Principe de la mthodeLe srum ou le LCR est mlang de lantigne cardiolipidique sur une lame porte-objet. Enprsence danticorps anti-lipodaux, il se forme une agglutination entre ces anticorps et lantignecardiolipidique. Sinon, la suspension garde une turbidit rgulire.

RactifsContenu du coffret VDRL :

Antigne cardiolipidique VDRL 1 flaconLiquide de dilution 1 flaconFiche technique 1

CompositionAntigne cardiolipidique VDRL,

de buf, en solution alcoolise ; contient :cardiolipine 0,3 g/llcithine 2,1 g/lcholestrol 9,0 g/lLiquide de dilution

formaldhyde 0,58 g/lNa2HPO4x 12 H20 93 mg/lKH

2PO

4170 mg/l

NaCl 10,0 g/l

Mises en garde et prcautions demploi1. Rserv un usage de diagnostic in vitro.2. LAntigne cardiolipidique VDRL en solution alcoolise est facilement inflammable. Bien fer-

mer le flacon et le tenir loign de toute source inflammable.3. Il est recommand de porter des gants de protection pendant toute la ralisation du test.4. Pour dcontaminer le matriel de laboratoire ainsi que les solutions infects, les autoclaver

pendant au moins 60 min +121 C. Il est galement possible dutiliser un dsinfectant appro-pri pour inactiver les virus pathognes pour lHomme. Respecter alors les concentrations ettemps dincubation indiqus par le fabricant.

Prparation du ractifPrparation de la suspension dantigne

Verser 0,4 ml de Liquide de dilution dans un rcipient en verre, puis distribuer lentement, tout enagitant le rcipient, 0,5 ml dAntigne.Veiller ce que la pipette nentre pas en contact avec le Liquide de dilution.Faire tomber les dernires gouttes dAntigne, puis remuer la solution en renversant lgrementle rcipient plusieurs reprises pendant quelques secondes.Ajouter 4,1 ml de Liquide de dilution, refermer le flacon, et agiter nergiquement en secouant leflacon la verticale.La suspension ainsi prpare doit tre utilise dans la journe.Prparation des srums

Inactiver les srums pendant 30 min +56 C 2 C. Si les chantillons ont t inactivs depuisplus de 4 heures, les inactiver de nouveau 10 min +56 C 2 C.

Stabilits et conditions de conservationTous les ractifs conservs +15/+25 C dans leur flacon dorigine non ouvert peuvent tre utili-ss jusqu la date indique sur ltiquetteStabilits et conditions de conservation des chantillons et ractifs aprs ouverture des flacons ouprparation des solutions la dilution demploi :

Ractif Etat Conservation Stabilit

Antigne cardio- aprs ouverture, +15/+25 C jusqu da te de p rempt ionlipidique VDRL dans flacon bien fermAntigne cardio- Dilu a la dilution d'emploi +15/+25 C 1 jourlipidique VDRLLiquide de dil uti on aprs ouverture, +15/+25 C jusqu da te de p rempt ion

dans flacon bien ferm

Autre ractif et matriel ncessaireSrum standard Syphilis (code ORDN) pour le contrle de la raction et la quantificationd'anticorps anti-cardiolipine.Lame porte-objet concavits.

Echantillons testerUtiliser des srums individuels prlevs selon les techniques standard de laboratoire.Les conserver 3 jours maximum +2/+8 C. Pour une conservation plus longue, les congeler.Inactiver les srums 30 min +56 C 2 C avant leur utilisation dans le test.

Ralisation du testTest sur lame porte-objet avec srum1. Distribuer 50 l de srum inactiv dans les concavits (14 mm) dune lame porte-objet, et

rpartir la solution dans chaque concavit.2. Ajouter 17 l de suspension dantigne laide dune pipette embout interchangeable.3. Agiter pendant 4 min sur un appareil rotation (180 50 rv/min et 1,9 cm de diamtre).Procder linterprtation des rsultats ds la fin de la rotation par une lecture au microscopeavec un grossissement x 100 :Pas dagglutination non ractifAgglutination douteuse raction douteuseAgglutination faible mais nette raction faibleForte agglutination ractif

Contrle de qualit internePour le contrle de qualit interne, utiliser le Srum standard Syphilis comme contrle.

Dtermination quantitative du taux danticorpsPour doser lanticorps anti-cardiolipine, effectuer le test sur lame porte-objet avec 50 ld'une sriegomtriques de dilutions du srum inactiv. Pour tablir les dilutions du srum, il est recomman-d d'utiliser le liquide de dilution.Dterminer le titre moyen corrig ou le nombre dunits internationales par ml selon les recom-mandations du Ministre de la Sant allemand, par titrage compar avec le Srum standard Sy-philis. Le titre correspond la valeur rciproque de la plus haute dilution considre comme"ractive".

Limites du test1. Ne pas utiliser de srums insuffisamment coaguls ni dchantillons contamins. Eliminer

avant le dbut du test les ventuels lments particulaires (par ex. caillot de fibrine, rythro-

cytes).2. En cas dutilisation dchantillons congels, veiller leur bonne homognisation.3. Le test ne doit tre effectu que sur des chantillons individuels, et non sur des chantillons

pools.4. Respecter scrupuleusement les tapes indiques pour la prparation de la suspension antig-

nique.

Caractristiques du testLAntigne cardiolipidique VDRL est appropri pour la mise en vidence des anticorps anti-li-podaux de type IgG et IgM.Son efficacit est contrle chaque lot laide de contrles positifs et ngatifs connus.

LittratureVoir mode demploi anglais.

Enzygnost est une marque dpose de Dade Behring Marburg GmbH aux USA, en Allemagne etdans dautres pays.


Edition Dcembre 2003


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Limitazioni della esecuzione del test1. Non utilizzare sieri non completamente coagulati e campioni da analizzare contaminati micro-

biologicamente. Eventuali particelle (ad es. coaguli di fibrina, eritrociti) presenti nel campionedevono essere eliminate prima del test

2. Se si utilizzano campioni scongelati, assicurarsi che siano completamente omogeneizzati3. Il reagente adatto solo per analizzare singoli campioni, non pool di campioni.4. Rispettare esattamente le istruzioni per la preparazione della sospensione degli antigeni.

Caratteristiche del testLantigene cardiolipina VDRL indicato adatto per lidentificazione degli anticorpi antilipoidei IgGe IgM.Il rendimento di ciascun lotto di reagente viene analizzato con controlli positivi e negativi clinica-mente noti.

BibliografiaVedi testo Inglese.

Enzygnost un marchio registrato della Dade Behring Marburg GmbH negli USA, in Germania enegli altri Paesi.


Edizione Dicembre 2003

Antigene cardiolipina VDRLSettore dimpiegoLantigene cardiolipina VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) un reagente precipitanteche serve allidentificazione ed alla quantificazione degli anticorpi lipoidei nel siero.Il test stato sviluppato per analizzare singoli campioni e non pool di campioni.Il prodotto soltanto per uso diagnostico in vitro.

Significato diagnosticoLa rilevazione e la quantificatione degli anticorpi lipoidei di importanza diagnostica congiunta-mente alla diagnosi di sifilide, principalmente per il monitoraggio e la valutazione dell'efficcia della

terapia1-5

. I dati ottenuti devono essere valutati tenendo conto dei risultati dei test specifici per itreponemi (EnzygnostSifil ide, IgM-FTA-ABS, FTA-ABS, emoagglutinazione indiretta).Per la valutazione dei risultati, fare riferimento alla letteratura pertinente.

Principio del metodoIl siero o liquor viene mescolato con antigene cardiolipina su un portaoggetti. In presenza di anti-corpi anti-lipoidei, si verifica unagglutinazione (flocculazione) con lantigene cardiolipina.In assenza di anticorpi anti-lipoidei, la sospensione rimane uniformemente torbida.

ReagentiContenuto della confezione VDRL:Antigene cardiolipina VDRL 1 pzDiluente 1 pzFoglietto illustrativo 1 pz

ComposizioneAntigene cardiolipina, bovina, in soluzione alcolica:Cardiolipina 0,3 g/LLecitina 2,1 g/LColesterolo 9,0 g/L

Diluente:Formaldeide 0,58 g/LNa2HPO4 x 12 H2O 93 mg/L

KH2PO4 170 mg/LNaCl 10 g/L

Avvertenze e precauzioni1. Solo per uso diagnostico in vitro2. La cardiolipina VDRL contenuta in una soluzione alcolica altamente infiammabile. Tenere il

contenitore ben chiuso lontano da sostanze combustibili.3. Si raccomanda di utilizzare guanti protettivi durante lintera esecuzione del test.4. Per lo smaltimento del materiale solido infettivo, si raccomanda il trattamento in autoclave a

+121 C per almeno 1 ora. Si possono utilizzare anche disinfettanti idonei allinattivazione degliagenti patogeni umani. Rispettare la concentrazione e il tempo dazione indicati dal produttore.

Preparazione dei reagenti

Preparazione della sospensione antigeneDistribuire 0,4 mL di diluente, in un flacone di vetro e aggiungere lentamente 0,5 mL di antigene,agitando continuamente il flacone.Fare attenzione che la pipetta non venga in contatto con il diluente.

Lasciar cadere soffiando lultima goccia ed agitare il liquido ancora per alcuni secondi.Aggiungere 4,1 mL di diluente, chiudere il flacone, ed agitare energicamente.La sospensione devessere utilizzata in giornata.

Preparazione del sieroInattivare i sieri per 30 minuti a +56 C 2 C. I campioni gi inattivati da oltre 4 ore, devono essereinattivati di nuovo a +56 C 2 C per 10 minuti.Non inattivare i campioni di liquor.

Conservazione e stabilitTutte le componenti sigillate del kit, conservate a +15/+25 C, possono essere utilizzate entro ladata indicata sulletichetta.I dati sulla conservazione e la stabilit dei reagenti aperti e dei reagenti diluiti per luso, sonoriportati nella tabella seguente.

Reagente Stato Conservazione Stabilit

Antigene cardiol ipina VDRL dopo aper tura +15/+25 C data di scadenzachiuso ermeticamente

Antigene cardiolipina VDRL diluto pronto per l'uso +15/+25 C 1 giornoDiluente dopo apertura +15/+25 C data di scadenza

chiuso ermeticamente

Materiale necessario ma non fornitoSiero luetico standard (codice ORDN) per il controllo della reazione e per la valutazione quantita-tiva degli anticorpi cardiolipina.Portaoggetti con pozzetti.

Campioni in esameUtilizzare come campioni da analizzare, sieri singoli prelevati secondo le tecniche di laboratoriostandard.Non conservare i campioni pi di 3 giorni a +2/+8 C. Per una conservazione pi lunga, i campionidevono essere congelati.

Prima del test, inattivare i sieri per 30 minuti a +56 C 2 C.Esecuzione del testTest su portaoggetti con siero

1. Dispensare sul portaoggetti con pozzetti 50 L di siero inattivato e distribuirlo.2. Aggiungere 17 L di sospensione di antigene usando una pipetta a stantuffo.3. Agitare per 4 minuti su agitatore fotante (180 50 rpm con movimento circulare di 1,9 cm).Leggere subito, a rotazione ultimata, con il microscopio ad un ingrandimento di 100 x:assenza di aggregati non reattivoaggrega ti non ch iaramen te riconoscibi li reatt ivo dubbioaggregati piccoli ma chiaramente riconoscibili debolmente reattivoaggregati grandi reattivo

Controllo di qualit internoPer il controlle di qualit interno viene utilizzato Lues Standard Serum.

Determinazione quantitativa del titolo anticorpalePer la determinazione degli anticorpi anti-cardiolipina, il test su vetrino viene eseguito con 50 Ldi ciascuna delle diluizioni seriali geomeriche del siero inattivato. Si raccomanda l'apposito diluen-te per diluire il siero.Il titolo medio corretto o il numero di unit internazionali per ml si ottengono, secondo le raccoman-dazioni delle Autorit sanitarie della Repubblica Federale Tedesca, dal confronto con l a titolazionedel siero luetico standard. Il titolo dato dal valore reciproco dellultima diluizione valutata come"reattiva".


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Antgeno VDRL-CardiolipinaCampos de aplicacinEl antgeno VDRL (Venereal Disease Research Laboratory)- cardiolipina es un reactivo de flocu-lacin y sirve para el reconocimiento y la cuantificacin del valor del anticuerpo lipiode en suero .El test fue desarrollado para la investigacin de muestras individuales no de muestras en pool. Elproducto debe ser usado nicamente en diagnsticos in vitro.

Significado diagnsticoEl reconocimiento y la cuantificacin del valor de los anticuerpos lipoidales es, en el marco deldiagnstico de Les, de significado diagnstico sobre todo en el control del desarrollo y la valora-cin del xito de la terapetica1-5. En este caso los resultados se deben ver en relacin con los

resultados de test especficos de treponemas (EnzygnostSfilis, IgM-FTA-ABS, Hemaglutina-cin indirecta).Para la interpretacin del resultado se remite a la literatura correspondiente.

Principio del mtodoEl suero o el liquido cefalorraqudeo se mezclan con el antgeno cardiolipina sobre un portaobje-tos. Si existen anticuerpos antilipiodales se presenta una aglutinacin (formacin de copos). En elcaso negativo la suspensin permanece uniformemente turbia.

ReactivosContenido del envase comercial VDRL:

Antgeno VDRL-Cardiolipina 1 unidadLquido diluyente 1 unidadBoletn informativo 1 unidad

ComposicinAntgeno VDRL-Cardiolipina,

bovino, contiene en solucin alcohlica:Cardiolipina 0,3 g/lLecitina 2,1 g/lColesterina 9,0 g/l

Lquido diluyenteFormaldehdo 0,58 g/l

Na2HPO4x 12 H2O 93 mg/lKH

2PO4 170 mg/l

NaCl 10,0 g/l

Advertencia y medidas de seguridad:1. Slo para el uso en diagnsticos in vitro.2. El Antgeno VDRL-Cardiolipina viene en una solucin alcohlica y es fcilmente inflamable.

Mantener el recipiente perfectamente cerrado y lejos de focos de i gnicin.3. Se aconseja utilizar guantes de seguridad durante todo el desarrollo del test.4. Para la eliminacin de materiales infecciosos se recomienda su colocacin en el autoclave por

lo menos durante 1 hora, a +121C. Tambin se pueden emplear medios de desinfeccin, quesean apropiados para inactivar agentes patgenos humanos. Los datos sobre concentracin ytiempo de accin dados por el fabricante deben ser observados.

Preparacin del reactivoElaboracin de la suspensin del antgeno

Agregar 0,4 ml de lquido diluyente en un frasco de vidrio y aadir lentamente, bajo agitacin,0,5 ml del antgeno.La pipeta no debe entrar en contacto con el lquido diluyente.

Soplar la ltima gota y agitar el lquido unos segundos ms.Aadir 4,1 ml de lquido diluyente, cerrar la botella y agitar fuertemente de forma.La suspensin debe usarse nicamente en el plazo de un da.Preparacin del suero

Inactivar los sueros durante 30 min. a +56 C 2 C. Las muestras se vuelven a inactivar nueva-

mente a +56 C 2 C despus de 4 horas.Las muestras de lquido cefalorraqudeo no se inactivan.

Estabilidad y almacenajeTodos los componentes del testkit, sin abrir y almacenados a una temperatura entre +15 y +25 Cse pueden usar hasta la fecha de vencimiento dada en la etiqueta.La estabilidad y las condiciones de almacenamiento de los reactivos abiertos o de las dilucionesde uso se pueden tomar de la siguiente Tabla.

Reactivo Estado Almacenamiento Estabilidad

Antgeno VDRL- sin abrir entre +15 y +25 C hasta la fecha deCardiolipina bien cerrado vencimientoAntgeno VDRL- se utiliza diluido entre +15 y +25 C 1 daCardiolipinaLquido diluyente sin abrir entre +2 y +8 C hasta la fecha de

bien cerrado vencimiento

Materiales adicionales necesariosSuero estndar Les (Nde pedido ORDN) para el control de la reaccin y la cuantificacin delanticuerpo cardiolipina.Portaobjetos con cavidad.

Material a investigarPara la investigacin se pueden usar sueros individuales que hayan sido tomados de acuerdo

con las tcnicas estndar de laboratorio.Las muestras se pueden almacenar mximo 3 das entre +2 y +8 C. Para un mayor tiempo dealmacenamiento se deben congelar.Los sueros se inactivan a +56 C 2 C 30 min. antes de la determinacin.

ProcedimientoEnsayo con suero en el portaobjetos1. Agregar 50 l del suero inactivado al portaobjetos con cavidad (14 mm) y repartirlo2. Aadir 17 l de la suspensin de antgeno con una pipeta de mbolo.3. Colocar durante 4 min. en un aparato de rotacin (180 + 50 r.p.m. y un circulo de movimiento

de 1,9 cm).La interpretacin se efecta directamente despus de que el rotor se detiene utilizando un micro-scopio con un aumento de 100-veses:Ninguna aglomeracin no reactivoAg lomerac in no muy reconoc ib le reactividad inc ier taAg lomerac in pequea, pero c lara reactividad dbi lAglomeracin fuerte reactivo

Control de calidad internoPara el control de calidad interno usar el suero estndar de Les como control.

Determinacin cuantitativa del contenido de anticuerposPara la determinacin del anticuerpo cardiolipina efectuar el ensayo el portaobjetos con 50 l, porc/u, de una serie de diluciones geomtrica del suero inactivo. Para diluir el suero se recomiendausar el lquido diluyente.El valor medio del ttulo corregido o el nmero de unidades internacionales por ml se obtienen deacuerdo a las recomendaciones del Ministerio de Salud Alemn por comparacin con una titula-cin similar con el suero estndar Les. Como ttulo se define el valor reciproco de la ltimadilucin que se pueda dar como "reactiva".

Limitaciones del Procedimiento1. Los sueros no suficientemente coagulados y las muestras a investigar contaminadas micro-

biolgicamente no se deben utilizar en el test. Las partculas eventualmente existentes (porej., cogulos de fibrina, eritrocitos) deben ser retiradas antes de empezar con el test.

2. Con las muestras descongeladas, se debe observar que haya una buena homogenizacin del material.3. El reactivo es apropiado nicamente para muestras individuales, no para muestras en pool.4. Las advertencias dadas se deben observar cuidadosamente en la preparacin de la suspen-

sin del antgeno.

Caractersticas del testEl Antgeno VDRL-Cardiolipina es apropiado para el reconocimiento de los anticuerpos IgG e IgMantilipoidales.Las caractersticas del reactivo van a ser comprobadas para cada lote con controles clnicospositivos y negativos conocidos.

BibliografaVer texto en ingls.

Enzygnost es una marca de fabrica registrada de Dade Behring Marburg GmbH en USA, Alema-nia y otros pases.


Edicin Diciembre 2003


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ORAA G11 C0840 (140) S 6

Manufactured by / Hergestellt von / Fabriqu par / Prodotto da / Fabricado por

In VitroDiagnostic Medical Device / In Vitro Diagnosticum / Dispositif MdicalDiagnostic In Vitro/ Dispositivo Medico per Diagnostica In Vitro/ Producto sanitariopara Diagnstico In Vitro

Lot Number / Chargenbezeichnung / Numro de Lot / Numero di Lotto / Nmero deLote

Expiration Date / Verfalldatum / Date de Premtion / data di scadenza / Fecha devencimiento / termo da validade

Storage Temperature / Lagertemperatur / Temprature de Conservation / Temperaturadi conservazione / Temperatura de almacenamiento / Temperatura de armazenagem

CE Mark / CE-Zeichen / Marquage CE / Marchio CE / CE Marca / Marca CE

Catalogue Number / Katalog Nummer / Rfrence / Codice Catalogo / Nmero deCatlogo

Consult Instructions for Use / Gebrauchsanweisung beachten / Consulter la Notice

d'Utilisation / Istruzioni per l'uso / Consultar Instucciones para el Uso / Consulte asInstrues de Utilizao

Symbols Key / Symbolschlssel / Explication des Symboles /Interpretazione simboli / Clave de los Smbolos / Chave dos Smbolos

IVD

LOT

EXPCCYY-MM-DD

REF

Results of Cardiolipin Microflocculation Test with Serum(magnified 100 x)

Reaktionsausfall des Cardiolipin-Mikroflockungstestes im Serum

(100fache Vergrerung)Rsultat de la raction de micro-floculation cardiolipidique dans le srum

(grossissement par 100)Risultati del Test di Microflocculazione alla Cardiolipina su siero

(ingrandimento 100 x)Resultados de la reaccin del test de microfloculacin de cardiolipina en el suero

(aumento de 100 veces)

= non reactive/nicht reagierend/ = borderline reactive/fraglichngatif/non rattivo/negativo = reagierend/positif douteux

rattivo dubbio/reaccin dudosa

+ = weakly reactive/schwach ++ = reactive/reagierend/ += reagierend/positif faible/ positif/reattivo/positivo

debolmente reattivo/dbilmentepositivo

+++= reactive/reagierend/ ++++= reactive/reagierend/ +++= positif/reattivo/positivo ++++= positif/reattivo/positivo

vdrl cardiolipin-antigen

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