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Versuchsübersicht
Mikrobiologische Wasseruntersuchungen
Tag Versuch 13
Bestimmung
der Kolonie-
zahl
Versuch 14
Nachweis
E. coli und
Coliforme:
Flüssigkeitsan-
reicherung
Versuch 15
Nachweis
E. coli und
Coliforme:
Membran-
filtrations-
verfahren
Versuch 16
Nachweis
E. coli und
Coliforme:
Colilert-
Verfahren
Versuch 17
Nachweis
E. coli:
Mikrotiter-
platten-
verfahren
Versuch 18
Identifizierung
mit API 20 E-
System
Montag Anlegen von
Gussplatten
Ansatz von
Flüssigkulturen
Membran-
filtration
Animpfen von
Quanti-Trays
Animpfen
von Mikro-
titerplatten
-
Dienstag - Subkulturen
Endo-Agar
Subkulturen
CASO-Agar
Auswertung - -
Mittwoch Auszählung Ansatz: kleine
Bunte Reihe
Oxidase-Test,
Auswertung
- Auswertung -
Donners-
tag
Auszählung Auswertung
Bunte Reihe
- - - Ansetzen von
Teststreifen
Freitag Auszählung Auswertung
Bunte Reihe
- - - Auswertung
Versuch Nr. 13: Bestimmung der Koloniezahl
1. Tag (Montag)
Proben: Trinkwasser, Ruhrwasser.
Beschreibung der Wasserproben.
Ansatz: - Trinkwasser unverdünnt
- Ruhrwasser 1:10, 1:100
und 1:1000.
Anlegen von Gussplatten mit
Hefeextraktagar.
Bebrütung: 22 °C und 36 °C.
2. – 4. Tag (Mittwoch bis
Freitag)
Auszählung der Kolonien nach
2, 3 und 4 Tagen (Mittwoch bis
Freitag).
Berechnen der Koloniezahlen
pro mL.
Quelle: Madigan und Martinko, Brock Mikrobiologie, 2006.
Quelle: Süßmuth et al., 1999
Versuch Nr. 14: Nachweis von E. coli und coliformen
Bakterien mittels Flüssigkeitsanreicherung 4. und 5. Tag (Donnerstag und
Freitag) Ablesen der Reaktionen aller Bunten
Reihen (positive bzw. negative
Reaktionen)
1. Lactose-Bouillon ( 36 °C, 24 h - 48 h):
Gas- und Säurebildung
2. Glucose-Bouillon (44 °C, 24 h):
Gas- und Säurebildung
3. Tryptophan-Bouillon (36 °C, 24 h):
Indolbildung
4. Nähragar (36 °C 24 h): Oxidase-Test
5. Citratagar (36 °C, 24 h - 48 h): Wachstum
Angabe der Ergebnisse:
Nachweis von E. coli, coliformen
Bakterien bzw. Nicht-Coliformen in
100 mL Wasserprobe.
Versuch Nr. 19: Identifizierung coliformer und
anderer Bakterien mit einem standardisierten
Testsystem (api 20 E)
1. Tag (Donnerstag)
Identifizierung von 4 Reinkulturen
auf Nähragar mit api 20 E-System
(aus Ruhrwasser gewonnene Isolate).
Beimpfen von 4 Teststreifen mit
4 Reinkulturen auf Nähragar aus
Versuch Nr. 14.
Bebrütung der Streifen: 36 °C, 24 h.
2. Tag (Freitag)
Auswertung und Identifizierung.
Mikrobiologisches Praktikum WS 2009/10
3. Woche: Wasseruntersuchungen
Versuchsablauf
Auswertung und Identifizierung Ablesen der Reaktionen und Protokollierung in Auswertebogen
(21 Reaktionen: "ONPG" bis "OX")
Oxidase-Test: Ergebnisse der
Reinkulturen auf Nähragar aus
Versuch Nr. 14 (Flüssigkeitsan-
reicherung)
Auswertung und Identifizierung
Ermittlung eines 7-stelligen Zahlenprofils (numerisches Profil).
Identifizierung anhand des Zahlenprofils im Analytischen-Profil-Index.
Ergebnisse in ausgehängte Tabelle eintragen.
Ergebnisse Praktikum-Mikrobiologie
Mikrobiologische
Wasseruntersuchungen
Bestimmung der Koloniezahl (Versuch Nr. 13)
Gruppe Koloniezahl (KBE/mL) nach 2
und 3 Tagen bei 22 °C
Koloniezahl (KBE/mL) nach 2
und 3 Tagen bei 36 °C
Ruhr Trinkwasser Ruhr Trinkwasser
1 2253/21000 0/0 125/365 3/0
2 643/13800 0/0 275/290 0/0
3 1600/9300 0/0 360/465 3/3
4 1622/11800 0/0 377/536 14/18
5 925/8700 0/0 235/365 0/1
6 1700/10350 0/0 230/371 0/0
7 1680 0 200 3
8 1025/8400 0/0 355/510 0/0
9 827/7000 0/0 221/280 0/0
10 891/17000 0/0 355/400 0/0
11 1275/13000 0/0 130/380 0/0
12 891/17050 0/0 355/405 0/0
E.coli und coliforme Bakterien: Flüssigkeitsanreicherung
(Versuch Nr. 14)
Gruppe E. coli und coliforme Bakterien in 100 mL Ruhrwasser
E. coli Coliforme Nicht-Coliforme
1 + + +
2 + + +
3 + - +
4 - ++ +
5 - - +
6 - - +
7 - + +
8 Nicht auswertbar Nicht auswertbar -
9 - + +
10 - + +
11 + + ++
12 + - +
Trinkwasserbefunde bei allen Gruppen: coliforme Bakterien und E. coli negativ in 100 mL
Identifizierung von Isolaten aus Versuch Nr. 14 mit dem
API 20 E-System (Versuch Nr. 18)
Gruppe Identifizierte Spezies
1 Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Aeromonas hydrophila/Vibrio
fluvialis
2 Shigella spp., Aeromonas hydrophila
3 Escherichia coli
4 Klebsiella pneumoniae, Citrobacter freundii, Enterobacter cloacae,
Aeromonas hydrophila/Vibrio fluvialis
5 Serratia marcescens/liquefaciens, Aeromonas hydrophila
6 Serratia sp.
7 Enterobacter cloacae, Aeromonas hydrophila
8 Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae
9 Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca
10 Enterobacter cloacae
11 Klebsiella oxytoca
12 Escherichia coli, Vibrio fluvialis
Coliforme Bakterien und E. coli in Ruhrwasser:
Membranfiltration (Versuch Nr. 15)
Gruppe Trinkwasser
(KBE/100 mL)
Ruhrwasser (KBE/100 mL)
Coliforme E. coli Coliforme E. coli
1 0 0 1858 275
2 0 0 2585 275
3 0 0 1190 240
4 0 0 5400 270
5 0 0 260 260
6 0 0 1400 190
7 0 0 1250 500
8 0 0 1450 500
9 0 0 1520 200
10 0 0 4429 290
11 0 0 318 210
12 0 0 1160 350
Coliforme Bakterien und E.coli: Colilert
(Versuch Nr. 16)
E.coli in Ruhrwasser: Mikrotiterplattenverfahren
(Versuch Nr. 17)
Gruppe E. coli
(MPN/100 mL)
Gruppe E. coli
(MPN/100 mL)
1 350 7 368
2 215 8 253
3 368 9 213
4 179 10 289
5 215 11 232
6 213 12 430
Mikrobiologische Anforderungen an Badegewässer
gemäß der EU-Badegewässerrichtlinie (2006)
Mikrobiologische Anforderungen an Badegewässer
Bewertung der Qualität eines Badegewässers anhand
Mikrobiologischer Befunde
Nach EU-Badegewässerrichtlinie:
Die Bewertung der Qualität eines Badegewässers erfolgt auf Basis von
Daten über vier Jahre (vier abgelaufene Badesaisons).
Maßnahmen nach hohen Einzelwerten - nach Badegewässerverordnung
NRW:
Wird bei der Badegewässerüberwachung für den Parameter
Escherichia coli ein Einzelwert von mehr als 1800 KBE/100 ml oder für
den Parameter Intestinale Enterokokken ein Einzelwert von mehr als
700 KBE/100 ml festgestellt, so ist eine sofortige Nachkontrolle durch-
zuführen. Liegen bei dieser Nachkontrolle die Messergebnisse wieder
über diesen Werten, ist ein zeitweiliges Badeverbot zu erlassen.
Badegewässer und Trinkwasser für das Ruhrgebiet
Verbund-Forschungsprojekt im Rahmen der BMBF-Initiative Risikomanagement von neuen Schadstoffen und Krankheitserregern
im Wasserkreislauf (RiSKWa)
Bakteriologische Untersuchungen an der Ruhr
Untersuchungsgebiet „Untere Ruhr“ (Baldeneysee/Ruhr),
8 Probenahmestellen
Boxplot-Diagram: mikrobiologische Parameter, 8 Probenahmestellen, Entnahme alle 2 Wochen,
maximal 184 Proben, Untersuchungszeitraum 13 Monate (April 2010 – Mai 2013). Medianwerte mit
Grenzen der 25. und 75. Perzentile. Striche nach oben und unten: Minimal- bzw. Maximalwerte.
Nachweishäufigkeiten (%) oben angegeben.
Location
Intestinal
enterococci E. coli
E. coli
(without rainfall
events)
RWW Styrum-Ost Excellent Poor Good quality
Löwental Sufficient Poor Good quality
Seaside Beach Good Sufficient Excellent
Polderpumpwerk Excellent Poor Excellent
Fischereiverein Good Poor Sufficient
Rote Mühle Good Poor Good
Zornige Ameise Sufficient Poor Poor
BarCelona Good Poor Sufficient
Klassifizierung der Badegwässerqualität nach
der EU Badegwässerrichtlinie.
Badesaison von Mai bis September 2012.
www.sichere-ruhr.de
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