nachweismethoden für clostridium botulinum und die ... · • lähmung der muskulatur beginnend im...
TRANSCRIPT
Nachweismethoden fürClostridium botulinum und
die Neurotoxine
Alfred BinderZentrales Institut des Sanitätsdienstes der
Bundeswehr München, LaborabteilungVeterinärmedizin, Außenstelle Munster,
Erkrankung Mensch
• entsteht durch Verzehr kontaminierter Lebensmittel (Fleisch,Fisch, Gemüse-, Fleischkonserven)
• beim Menschen bes. durch die Toxintypen A, B und E• Toxinaufnahme oral oder aerogen (letal für den Menschen ist ca. 1
µg)• Hemmung der Erregungsübertragung vom Nerven zum Muskel
durch Störung der Acetylcholinfreisetzung• Lähmung der Muskulatur beginnend im Gesicht, danach obere und
untere Gliedmaßen und schließlich Atemlähmung und -stillstand• an die Nervenzelle gebundenes Toxin ist nicht mehr inaktivierbar
Klassischer Botulismus -Lebensmittel
• kontaminierte Lebensmittel (Fleisch, Fisch,Fleisch- und Gemüsekonserven).
• allein die Aufnahme des bereitsproduzierten Toxins ist entscheidend.
Lebensmittel-Botulismus• Typ A Gemüse- und Fruchtprodukte in den
USA• Typ B Wurst- und Fleischwaren in Europa• Typ E Produkte aus Meesrestieren weltweit• Typ F selten in Wurstprodukten
Gesamtzahl
30 - 40 /Jahr
ç Typ A Typ B è
Säuglings-Botulismus• in USA häufigste Form (80-100/Jahr)• bei Kindern < 1 Jahr• Kolonisation des Darms mit Cl. botulinum
und Produktion von Toxin• protrahierter Krankheitsverlauf• Nachweis von Toxin bes. im Stuhl
80 - 100 Fälle / Jahr
Wundbotulismus• seltene Infektion von Wunden mit Cl.
botulinum aus der Umgebung• bes. bei injizierenden Drogenabhängigen
Erkrankung Tier• durch Typ C bei Wasservögeln• durch anaerobe Verhältnisse in Gewässern• durch Typ D bei landwirtschaftlichen
Nutztieren (bes. Rinder)
Nutztiere• Typ D durch Kontamination des Futters mit
Tierkadavern• Typ B bei Wachstum von Cl. botulinum
z. B. in der Silage• Typ C evtl. als Ursache der Equine Grass
Sickness bei Weidetieren– Vermehrung bes. im Ileum
Cl. botulinum
Cl. botulinum Lipase-Reaktion
Tierversuch• Toxinneutralisation im Mausversuch• bei Toxindifferenzierungen bis zu 50 Mäuse
pro Ansatz• Seren sind schwierig zu beschaffen• Test ist vorher zu standardisieren (2
antitoxische Einheiten /ml)
Tox A Tox B Tox E Tox F
Cl. botulinum• Tox C 290 bp• Tox D 497 bp
Cl. botulinum• Tox C 290 bp• Tox D 497 bp
ELISA Toxin A
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4
ng/ml
Ext
inkt
ion
450
nm
Tox A
Gemüsekonserve
ELISA Toxin BBotulinum-ELISA
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
1,6
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3
ng/ml
Ext
inkt
ion
450
nm
Tox B
Wurst, Schinken
ELISA Toxin E
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
1,6
0 1 2 3 4 5 6
ng/ml
Ext
inkt
ion
450
nm
Tox E
Fisch
Tox A/B
positiv
25-50 ng
negativ
Zusammenfassung• PCR-Nachweis für Typ A, B, E, F in
Kultur, Lebensmittel• ELISA-Nachweis der Toxine für A, B, E in
Kultur, Lebensmittel, Serum• C- und D-Nachweise müssen die Bildung
von Toxin über wenige Passagenberücksichtigen